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AbMole精研抑制劑十年,最新的科研動(dòng)態(tài)不斷與您分享。本期與您分享的是:黃芪甲苷通過(guò)抑制氧化應(yīng)激和 Calpain-1 激活防止高血糖引起的血管內(nèi)皮功能障礙。

血管內(nèi)皮細(xì)胞作為循環(huán)血管與血管壁之間的選擇性屏障,在心血管疾病的發(fā)生發(fā)展中起重要作用。黃芪甲苷(As-IV)對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞具有保護(hù)作用,但其潛在機(jī)制尚不清楚。本研究旨在研究 As-IV 對(duì)內(nèi)皮功能障礙 (ED) 的影響。雄性 Sprague-Dawley (SD) 腹腔注射 65 mg/kg 鏈脲佐菌素 (STZ) 以誘發(fā)糖尿病,然后口服 As-IV (40, 80 mg/kg) 8 周。通過(guò)體內(nèi)和體外的血管反應(yīng)性評(píng)估血管功能。 Western blot檢測(cè)糖尿病大鼠主動(dòng)脈中鈣蛋白酶1和eNOS的表達(dá)。使用硝酸還原酶法測(cè)量NO產(chǎn)生。通過(guò)測(cè)量 SOD、GSH-px 和 ROS 來(lái)確定氧化應(yīng)激。

結(jié)果表明,As-IV 給藥顯著改善了體內(nèi)糖尿病相關(guān)的 ED,并且 NAC(一種抗氧化劑)和 MDL-28170(鈣蛋白酶-1 抑制劑)均顯著減輕了體外高血糖引起的 ED。同時(shí),用抑制劑 l-NAME 預(yù)處理幾乎消除了所有組大鼠對(duì)乙酰膽堿的血管舒張。此外,As-IV 增加了糖尿病大鼠胸主動(dòng)脈中 NO 的產(chǎn)生和 eNOS 的表達(dá)。此外,糖尿病大鼠ROS水平顯著增加,SOD和GSH-px活性降低,而As-IV給藥以濃度依賴性方式逆轉(zhuǎn)這種變化。這些結(jié)果表明 As-IV 通過(guò)減少氧化應(yīng)激和鈣蛋白酶 1 來(lái)改善糖尿病大鼠胸主動(dòng)脈的內(nèi)皮功能障礙。 

MDL-28170 (Abmole, M7934,純度 >95%) 被用于培養(yǎng)HUVECs,濃度 20 μM,時(shí)間24h。

Fig. 2. NAC and MDL-28170 attenuates high glucose (HG)-induced impairment of endothelium-dependent relaxation in rat thoracic aorta mainly through NO.

體外研究表明,高糖治療后HG組EDR顯著受損。 重要的是,與 NAC 和 MDL-28170 預(yù)孵育,在高糖處理的主動(dòng)脈環(huán)中重新存儲(chǔ)對(duì) ACh 的松弛。

Fig. 6. As-IV administration inhibited calpain-1 expression and oxidative stress in HUVECs.

結(jié)果表明,As-IV 抑制了 calpain-1 的表達(dá),減少了 ROS 的產(chǎn)生并增加了 SOD 和 GSH-Px 的活性。 同時(shí),上述 As-IV 對(duì) HUVEC 的作用與 NAC 和 MDL-28170 相似。

Fig. 7. As-IV administration increased eNOS expression and NO bioavailability in HUVECs.

為了研究 As-IV 的作用機(jī)制,在加入高糖(33 mM 葡萄糖)48 小時(shí)前 2 小時(shí)加入 As-IV(100 μM)、NAC(2 mM)和 MDL-28170(20 μM) H。 如圖 7 所示,高糖處理降低了 eNOS 的表達(dá)和 NO 的產(chǎn)生,這些變化在 As-IV、NAC、MDL-28170 的存在下被逆轉(zhuǎn)。 

鳴謝:Qu Nie, et al. Life Sci. 2019 Sep 1;232:116662.


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